2024-08-26
| 项目名称 | 血液布鲁菌DNA提取试剂盒 | |||
| 项目负责人 | 姓名 | 翟景波 | 专业 | 免疫学 |
| 联系 | 187****9716 | 职称 | 教授 | |
| 市级以上荣誉 | 2022年自治区科技进步二等奖，2019年通辽市优秀科技工作者 | |||
| 项目组其他成员 | 吕昌龙、刘鑫、温树波、吴东兴、宋扬、高巍 | |||
| 项目主要内容 |
PCR方法比血清学方法和细菌培养的敏感性高。因为血细胞中出现细菌及细菌碎片要比特异性抗体出现的早，所以PCR方法检测布病能在短时间内出结果。而且这种方法与细菌感染途径、菌株的毒力无关，因此在早期诊断中具有无可比拟的优越性。 检测血清布鲁菌DNA包含以下操作步骤： 取0.2 mL血清于1.5 mL Ep管中；室温，15000×g，离心15分钟；弃上清；加Solution V 0.2 mL于1.5 mL Ep管中；震荡；室温，15000×g，离心10分钟；弃上清；加Solution V 20 μL于1.5 mL Ep管中；震荡，瞬间离心；100 OC，加热10分钟；置于冰中或－20 OC冰箱中2分钟；室温，15000×g，离心10秒钟；吸取15或10 μL上清液做模板，进行PCR（包括荧光定量PCR）反应。 检测血细胞布鲁菌DNA包含以下操作步骤： 取1 mL外周血；加Solution I 1 mL混匀；平铺到6孔细胞培养板上；37 OC孵育1小时；弃掉上清液，用Solution II洗净至无红色；加Solution II 1 mL于细胞培养板孔内，反复吹打，洗下孔底部的沉淀物（即，活的单核细胞）至1.5 mL Ep管中；4 OC 500×g离心5分钟；弃上清；加Solution III 800 μL，充分混匀；加Solution IV 8 μL，充分混匀；55 OC孵育1小时；室温，8000 rpm离心10分钟；弃上清；加Solution V 800 μL，充分混匀；室温，8000 rpm离心10分钟；弃上清；加Solution V 20 μL，震荡，充分混匀；100 OC，加热10分钟；室温，15000×g，离心10秒钟；吸取15或10 μL上清液做模板，进行PCR（包括荧光定量PCR）反应。 血清血细胞同步检测法可用于布鲁菌感染早期临床快速诊断和治疗过程中指导用药，还可用于预后判定和布病流行病学调查等方面。 | |||
| 核心技术或主要创新 |
该试剂盒建立了一种能够检测布鲁菌感染的方法，即“血清血细胞同步检测法”。该方法能明确布鲁菌存在部位，即单纯血清中含有、单纯血细胞中含有、或血清血细胞中同时含有。在临床诊断以及治疗过程中意义重大，且操作安全性高，提取外周血中布鲁菌 DNA 灵敏度高，用于后续临床诊断准确率高，几乎无漏检，可用于早期快速诊断，使临床诊断无窗口期。 该试剂盒的研发很大程度上弥补了现有DNA提取试剂盒处理的模板进行PCR检测普遍存在的假阴性等不足之处，使得 PCR 技术能更广泛的应用于临床诊断，并在监测布病患者病情、预后以及指导用药等方面有着广阔的应用前景，也为进行布鲁菌的科学研究提供了一种强有力的工具。因此，该方法将为布病临床诊断开创一个新领域，并且可成为临床上布病有效的诊断方法。 | |||
| 所属技术领域 | ☑绿色农畜产品加工产业 □清洁能源产业 □现代化工产业 |
□新材料和现代装备制造产业 □生物医药产业 □电子信息技术 | ||
| 成果获取方式 | 自主研发 | □个人 ☑团队 | ||
| 合作研发 | □与其他高校合作 □与其他科研院所合作 ☑与其他企业合作 | |||
| 成果体现形式 | □新技术 □新工艺 ☑新产品 |
□新材料 □新装备 □新品种 |
□其他应用技术(请说明) | |
| 获取知识产权 | ☑发明专利 □实用新型专利 □外观专利 |
□植物新品种 □软件著作权 ☑论文、专著 |
□其他(请注明) | |
| 拟落地或转化形式 | □自行转化 ☑转让转化 □许可转化 |
□共同转化 □技术入股 |
□其他（ ） | |
| 落地或转化最需要的支持 | ☑专项资金扶持 ☑产业化项目支持 □共享平台服务 |
□税收优惠 □科技中介 □科技金融 |
□其他(请注明) | |
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